跟著師妹的步伐走向實驗室,記憶中的一切都鮮活起來,研究生所在的城市位於粵省,和四季分明的老家不一樣,這裡的一年四季總是花團錦簇,萬紫千紅。
僅僅是王薩三年的研究生生活裡,就認識了許多種色彩豔麗的花。鵬城即便是一年裡最冷的時候也有勒杜鵑裝點,紫色夢幻,玫紅浪漫,整座城市永遠被花兒裝點。現在是十月底,在王薩老家,梧桐大道蕭瑟壯麗,銀杏葉紛紛掉落枝頭,世界宛然是金黃色的,清冷是秋天獨有的高貴。而鵬城的秋卻依然是爭奇鬥妍,大著肚子的異木棉不約而同地競相開放,不同於成熟的紅色,異木棉的顏色是少女獨有的嫩粉。
如今,異木棉又一樹樹綻放,而王薩卻不是那個感性到會駐足欣賞花開的,被同性鄙視“母0”的正常性取向男青年了。世之奇偉瑰怪,必然真美善,可經歷社會的毒打,王薩不再是那個純真的少年,有限的時間不至於發呆一下午與自然為伴。
欣賞,要有度。人,要有物質基礎。
停頓了2秒欣賞實驗樓下五角星形的異木棉花朵,也不去逗樓下血液實驗室師姐養的狸花貓,王薩基本不做停頓地跟隨師妹進了實驗室。
檢查了一下師妹的蠟塊,人腦膠質瘤的石蠟樣本,表面光滑,組織包埋完整,待會王薩會帶著師妹去切片室,切完片後拷片過夜備用。
花幾分鍾整理一下師妹的述求:製備IHC染色標本——4um厚度腦膠質瘤FFPE(石蠟切片);確認MOG和FcRn兩類抗體是否能正確染上FFPE。ok,小意思,王薩反手就是一個:
IHC (破次元壁:需要的讀者自取,自己整理的可能有疏漏...)
第一天
1.脫蠟:浸泡於100%二甲苯1,100%二甲苯2各10min
2.脫水:浸泡於梯度酒精(100%酒精1,100%酒精2;80%酒精,75%酒精)中各10min
3.脫蠟脫水過程中配置①TBST溶液②抗原修複液③一抗
①TBST:900ml純水+100ml 10X TBST+1ml Tween20
②1X Citrate PH6抗原修複液:1:100 100XCitrate PH6+100ml純水
③一抗:根據抗體手冊或官網信息稀釋為IHC實驗所需濃度,一抗稀釋液:DAKO
4.清洗:TBST溶液清洗 5min X 3次
脫蠟脫水和清洗的目的是讓組織充分暴露出來,以便我們的後續操作。
5.抗原修複:玻片放置器皿中,水浴加熱至95度後,修複20min,後冷卻恢復至室溫
高溫加熱使組織上的抗原得到修複
6.清洗:TBST溶液清洗 5min X 3次
7.加一抗:4°過夜
第二天
8.配置DAB顯色液:1mldiluent+30ul DAB concentrate
9.清洗:TBST溶液清洗 5min X 3次
10.加二抗:二抗不需要稀釋,孵育1h
11.清洗:TBST溶液清洗 5min X 3次
12.顯色:配置好的DAB染色玻片,及時用流水終止染色
13.複水:浸泡於梯度酒精(75%酒精,80%酒精,100%酒精1,100%酒精2)中各10min
14.複蠟:浸泡於100%二甲苯1,100%二甲苯2各10min
15.封片:封片劑提前拿出,使用前離心,氣泡會集中在上層,吸取的時候注意不要吸到氣泡。注意封片劑的體積,風乾。室溫保存即可。
小手一揮,不到10分鍾就寫出來了,只是。。。王薩突然發現,自己忘記了很多很多東西,這一次,他要把屬於自己的東西就拿到手。。。