第171章 169.非要衝上來挨頓毒打
第二天,秦志峰還在病房忙呢,老師喬梁平就給他打來了電話,“你現在來一趟吧,咱們去找張主任匯報下工作。”
喬梁平想了一夜,決定服軟了,沒辦法,他是快退休了,可還有這麽多弟子在這呢,萬一張主任真的不講武德,那他們的處境恐怕會很艱難。
可千萬不要小看一個大型三甲醫院科主任的能力,你只要你在這個科室裡面,他想收拾伱是很輕松的事情,光職稱晉升這一塊就能把你卡的死死的。
“老喬,你這是?”張主任明知故問道。
“張主任,我糊塗啊。”喬梁平一臉後悔道,“我當時是起了妒忌之心,這才在協會亂說的,這幾天我反思了一下,覺得自己的問題很嚴重,特意過來向你負荊請罪。”
“你看看你,這說的什麽話。”張主任笑眯眯道,“我知道你肯定也是為了協會考慮,不過的確是有點考慮不周,這也不是什麽大問題嘛。”
“只要及時改正就行了。”
“那我現在就給沈主任打個電話,認個錯。”喬梁平說道,他是徹底的不要面子了,沒辦法,挨打就要立正,這是態度問題,要麽死扛,要麽就老老實實的服軟。
“那沒必要,我跟她說一聲就行了。”張主任算是給他留了幾分顏面。
“那太麻煩張主任了。“喬梁平這會一點心氣也沒了,“志峰這個帶組的事..”
“今年不行了,名額都給老袁了。”張主任出聲道,“等明年吧,我先給你簽個字,你一會兒拿過去交給醫教部。”
出了門,喬梁平感覺好多了,“都是老師的錯,沒事到處亂樹敵,害的你又耽誤了一年。”
“就一年,我等得起。”秦志峰松了一口氣,他心裡倒是沒有責怪老師的意思。
沈主任很快就接到了張主任的電話,“這個老張,挺有一套的嘛。”她笑著對趙主任說,“那個喬主任,還敢在我面前倚老賣老,真是給他臉了。”
“就是,明明跟他一毛錢關系都沒有,非要衝上來挨頓毒打。張主任的手段我可是聽說過的,肯定被收拾的不輕。”趙主任隨口說道。
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X鄉這邊,胡嘉然正在實驗室裡面發愁,他們遇到了難題。
融合用飼養層細胞製備還算比較順利,腹腔巨噬細胞來源方便並且製備簡單,最重要的是其中的巨噬細胞具有清除死亡細胞和吞噬細胞碎片的能力,因此一般融合時會選擇腹腔巨噬細胞作為飼養層細胞。.
“取7~8周齡雌鼠脫頸椎處死,於70%酒精浸泡消毒,然後超淨工作台內用無菌手術剪將小鼠腹部剪開一個小口,鑷子剝離周圍皮膚以便露出腹腔;”
棄上清,加入1ml完全培養基重懸細胞,然後稀釋至所需用量體積,加入到96孔板;
這一步就算完成了。
接下來是免疫鼠脾細胞的準備,這一步雖然不容易,但也沒能對胡嘉然他們造成太大的困擾。
細胞融合當天需要取三天前衝擊免疫過的小鼠作為免疫脾細胞的來源,一般情況下免疫小鼠的脾髒體積大小是正常小鼠的兩倍。
“在超淨工作台內用高壓滅菌好的手術剪將小鼠胸腔左下側開一個小口,用鑷子摘取脾髒後放於含3~5ml不完全培養基的皿中,剔除周圍結締組織,將脾髒轉移至潤濕的0.4目篩網中用研磨棒輕柔研磨,加入適量預冷的不完.”
原來胡嘉然挺高興的,但沒想到在融合的時候遇到了麻煩。
高風給的實驗流程中是要將骨髓瘤細胞和免疫鼠脾細胞進行融合,可他們進行了多次的實驗,結果均以失敗告終。
“我感覺是比例的問題。”嶽鵬輝說道,“兩種細胞的比例在融合的時候起著很關鍵的作用。”
“還有溫度!”一個叫王偉的說道,他是研究生學歷,基本功很扎實,胡嘉然早就注意到了這個人。
“還有攪拌的速率。”剛來不到1個月的徐兵也發表了意見,“過快的攪拌速率會導致脾細胞破裂,太慢的話又容易凝固,我覺得速度為25r/min最為合適。”
眾人都七嘴八舌的說了起來,實驗到這個地方卡住了,都1周多了,一點進度也沒有,大家都很著急。
“說的都挺有道理。”胡嘉然做了總結,“那接下來該怎麽辦呢?”
“能怎麽乾啊?往死裡乾唄。”王亮喊了起來,“四點睡,六點起,閻王誇我好身體!”
胡嘉然突然對這個逗比滿意極了,“加班費發雙倍的。”他同時使出了無堅不摧的鈔能力。
半月後.
“這兩天放假,大家好好歇歇。”胡嘉然很興奮,但聲音中明顯透露著一股子虛弱。
他強打精神,開始把實驗的詳細流程給記錄了下來:
充分打散沉澱,將1ml經過32℃預熱的50% PEG勻速加入離心管中(用1ml的移液器,5 min內加完),期間用移液器槍頭輕柔攪拌;
持續緩慢的用槍頭攪拌3~4分鍾;
勻速加入1ml經過37℃預熱的不完全培養基(1 min內加完),期間用移液器槍頭輕柔攪拌;
再勻速加入3ml經過37℃預熱的培養基(3 min內加完),期間用移液器槍頭輕柔攪拌;
融合後24小時內補加含HAT的選擇性補液培養基,50μl/well;
補液兩天后進行第一次半換液,每孔吸出60~80μl的培養基,第一次半換液培養基內HAT含量減半,50μl/well;
再過兩天后進行第二次半換液,每孔吸出60~80μl培養基,換成含HT的培養基,50μl/well。
“你要不歇歇再弄吧。”齊楠楠在一旁勸道,“我這段時間真怕你猝死了。”
“怎麽可能?”胡嘉然頭都沒有抬,“我虎著呢。還有,齊楠楠,我能不能給你提個建議啊?”
“你說。”
“就是你處死小白鼠的時候,能不能不要老是露出那種變態的笑容啊?”他嫌棄道,“連王亮那麽變態的人都說你不正常。”
“有病吧,你們!”齊楠楠不樂意了,“我殺幾個老鼠我招誰惹誰了?那下次我面無表情好了。”
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王亮幾人正在街邊擼串,這邊大學城人超級多,非常有生活氣息。
“你們看這些女孩子,真的漂亮。”有人直流口水,“醫學院女生多,不像咱們專業,一個系全是大老爺們,根本找不到對象。”
“是啊,我宿舍裡面6個人,4年下來全是單身狗。”
“唉,本來想著畢業後能很快找一個女朋友呢,誰知道比上學時候還難呢,艸!”
“胡工不是說等項目完成了,給咱們找個公司聯誼嗎?”嶽鵬輝眼中露著希冀,“要我說,省醫的護士就行,長得漂亮的肯定很多。”
說起女生,男人嘴裡永遠不會缺少話題。
“馬上到10號了,咱們工資也快發了吧。”有人說起了這個事,“我大概算了一下,要真是按胡工說的,那我這個月至少拿3萬。”
“我跟你差不多啊。”幾人說起這個興致都很高。
“馬上就發了。”王亮給大家透露道,“昨天我聽到胡工給趙經理打電話了,提起了這個事,說要盡快發放,以提高大家的積極性。”
他說話的空隙拿起了手機查詢了一下銀行帳戶,“臥槽,發過了!”
聽到他的話大家都不淡定了,紛紛查了起來,“我記得不是有一個什麽到帳提醒功能嗎?就是有人給打錢,可以短信通知的。”
“那個得自己到銀行開通短信提醒,一個月2塊錢。”
“鵬輝,你發了多少錢?”王亮問道。
“個人隱私。”
“你大爺的隱私,快讓我看看。”王亮伸手把他的手機拿了過去。
“43000?”王亮愣住了,“不是,這憑啥啊?你比我多了快1萬塊錢!”
“人家鵬輝關鍵的地方起了好大作用呢,哪像你一樣,天天劃水。”有人笑道,“我要是老板,早給你丫趕出去了。”
趙興業今天上午的時候特意給高風打了個電話,胡嘉然給報過來的工資單著實讓他大吃一驚,就這十幾個人,一個月要花掉公司近80萬,太誇張了!
“要不我過去審核一下?”他小聲提議道。
“沒必要,他們這個月加班多。”高風很隨意的說道,“熬夜最容易掉頭髮了,這些人將來肯定要禿頂的。”
“我看你最近也是來回跑,挺辛苦的,不行給自己也漲點工資吧。”說完高風就掛斷了電話。
趙興業半天沒回過神,他陷入了深深的懷疑之中,這老板到底什麽情況啊?總感覺公司不是他開的。
“趕緊把雜交瘤細胞克隆化給做起來。”高風對胡嘉然說道,“這一步很重要,結果出來後,你第一時間把數據帶回來給我,寫文章要用的。”
胡嘉然本來想適當放慢下進度的,他真怕這些科研民工哪天猝死了,不過既然高風發話了,那大家還是得趕緊動起來。
鞭打快牛!
雜交瘤細胞的克隆化一般是指針對於抗體陽性孔的克隆化。在實際實驗操作中,會有數個或者更多的克隆,其中可能包括所需的抗體分泌細胞,抗體非分泌細胞,及其他無關抗體的分泌細胞。克隆化的原則是,對於檢測抗體陽性的雜交克隆盡早進行克隆化。
因為非抗體分泌細胞的生長速度比抗體分泌細胞的生長速度快,抗體分泌細胞的生長就會被抑製,最終二者的競爭結果會造成抗體分泌細胞的丟失。
目前,常用的細胞單克隆方法主要是以下二種:有限稀釋法,流式細胞熒光分選技術。
有限稀釋法是目前應用比較多的單克隆挑選方法,優點很明顯,操作簡單,對儀器設備的需求比較低,並且方便後續的工藝開發。
它的缺點也很明顯,耗時較長,效率低,成本高,失誤率高。由於該方法對人工依賴比較高,獲得高單克隆率,需要多輪有限稀釋。
流式細胞熒光分選技術根據細胞大小、熒光染料和細胞表面特點等因素挑選出所需要的單細胞,該技術已廣泛應用於單細胞分離、稀有細胞分選等實驗過程中。優點是操作簡單,周期短,缺點是單克隆率具有不確定性。
根據細胞形態獲得的單克隆細胞,會產生多個存在微小差異的細胞,這樣的差異在傳代擴增之後,依然會出現過度增殖,從而影響單克隆的純粹性。
而高風給胡嘉然提供的是一種新的克隆方法,叫高通量設備自動化篩選,優點是人工乾預少、通量大,其優勢很明顯,成本低,效率高,缺點則是對技術的要求比較高。
實驗室裡面的眾人都沒聽說過這種方法,大家一臉的茫然。
“風哥,這個恐怕不行啊,你說的這個大家聽都沒聽過,市面上也沒有這種儀器賣。”胡嘉然給高風打電話,“我們研究了幾天,真是沒有頭緒。”
“別慌,我現在就過去一趟。”高風沒有著急,這個時候他也該親自下場了。
“首先我們要構建一個自動化液體處理系統。”高風對一眾科研民工講道,“這種系統通常由多個液體處理單元組成,能夠根據不同實驗的需求,自動完成液體移液、混合等操作。自動化液體處理系統具有高精度、高速度、高可擴展性的特點,可以同時處理多個樣品,能迅速提高篩選效率和準確性。”
“市面上暫時沒有賣的,但咱們可以自己做一個,並不難,只需要把一些儀器集成到一塊就行了。”他自信滿滿,這一步他在系統空間裡面做過了,完全達到了系統的要求。
“這是圖紙,你聯系趙律師申請專利。還有,再買10台高速離心機.”臨走的時候高風對胡嘉然交代道,“2周內把這個做出來,有編程和集成方面難題直接找專業人士,不要怕花錢,咱們不能再浪費時間了。”
胡嘉然壓力挺大的,照目前的進度來看,三個月肯定是不行的,四個月能出來結果就燒高香了。
大家都忙的不行了,開工的時候買的發財樹由於沒人澆水,都已經枯死了。
看著全是黃葉的枯樹,胡嘉然歎了口氣,“不是說發財樹耐旱嗎?怎麽就這麽快死了呢?這兆頭可不太好啊。”
“下班的時候找兩個人給扔了吧。”
“發財樹嘛,樹死了,不就剩發財了嗎?”王亮說道。
“好像是這麽個道理.那先放這?”胡嘉然。
今天就一章了明天更一萬字。
(本章完)