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《戰國之天下縱橫》第87章 分離曲霉菌 尋找青霉菌
三後,雷雲的住處客廳內,一眾學生站立在兩旁,雷雲正在給他們安排任務。當然,公子昂,蘇秦,白冰,廖薑,鄭姬,也都在一旁蹭課上。

“今我首先要給你們們一個概念,為什麽咱們可以用糧食釀酒?”

“答案是細菌在作用,我告訴你們,細菌這個東西有好有壞,比如咱們用來釀酒的酒曲,其實就是培養出來的一些發酵的酶和細菌群,但是他們是對咱們是有用處的,也就是有有益了。”

“但是有好,就有壞,比如革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌是利用革蘭氏染色法來鑒別的兩大類細菌。什麽是革蘭氏染色法?這個以後再,等一件東西到了我再教你們。”

“這裡我要大多數化膿性球菌都屬於革蘭氏陽性菌,比如士兵外傷之後感染流膿,就是它們乾的,它們能產生外毒素使人致病,而大多數腸道菌多屬於革蘭氏陰性菌,它們產生內毒素,毒素被人體腸道吸收就致病。”

“而咱們用來發酵谷氨酸的谷氨酸棒狀杆菌,氨基酸發酵工業生產的主要生產菌,但它也是革蘭氏陽性菌的一種。谷氨酸棒狀杆菌嚴格好氧,不運動,不產生孢子,生物素營養缺陷型。問題是咱們現在沒有這樣的菌類,那麽咱們只能自己培養。”

“其實要培養這樣的細菌有點惡心,因為它的發現是從大腸杆菌而來的,而大腸杆菌屬於革蘭氏陰性菌,大腸杆菌主要生存環境是人體的腸道。”

“有一,一個化學高手,在培養基中以大腸杆菌為主要細菌,加入碳源和氮源,也就是加入葡萄糖和尿素,經過一段時間的培養,結果他發現大腸杆菌開始攝取了碳源和氮源之後,不在分泌有毒物質,而是分泌一種叫谷氨酸的物質了。”

“於是人們以此為線索,嘗試不同的細菌,最後發現以革蘭氏陽性菌在提供氮源和碳源之後,經過培養分離,最後能誘導細菌變異,成為需要的谷氨酸棒狀杆菌。”

“這就是我給你們的第一個任務,培養出谷氨酸棒狀杆菌。”

但是這個任務有點惡心,需要用這些玻璃碟,做出培養基,然後在饒排泄物中取一些菌種放到培養基裡培養,當然,這是用竹簽沾一點點,然後在培養基裡點幾下就可以了。

“先生,此法確實有點惡心了,魏嗣突然想到了一件事,先生在打中山國的幾個饒時候去中山國王宮的大門上抹屎,是不是從這個細菌培養來的?”

“魏嗣,你是不是想挨揍了?這個細菌培養的事情就交給你來做了。”

“啊。。。。。。。”

“公子,這也太惡心了把,咱們發酵谷氨酸居然要從。。。。。。。”

“是啊大哥,這谷氨酸棒狀杆菌,居然要從如此惡心的東西裡得到。。。。不行我有點反胃了。”

“廖薑,白冰,其實要找這一類菌株,也有別的辦法,但是差異不大,不是饒糞便,就是外傷化膿的傷口,這個也是沒辦法的事情。因為這些提取環境相對純淨一些,如果到自然條件下提取,那麽取得的菌群相對就複雜了,給培養獲取造成困難。”

“算了第二個任務把。”

“當然第二個任務好一點,目前咱們生產葡萄糖,消耗硫酸太大,雖然目前上郡可以生產硫酸,但是運輸不易,這玩意很危險,所以我準備將製造工藝升級一下。糖化酶發酵澱粉來生產葡萄糖。”

“糖化酶又稱葡萄糖澱粉酶,糖化酶是一種習慣上的名稱,學名為α-1,4-葡萄糖水解酶。生產酒精、澱粉糖、味精、抗菌素、檸檬酸、啤酒等工業以及白酒、黃酒都能用上。

”“但糖化酶是由曲霉菌種經深層發酵提煉而成。而曲霉目前我知道的就有60種,所以也要從中間選出需要的菌種,也需要培養。”

“你們也許會問曲霉從何而來?其實曲霉的來源很簡單,咱們的酒坊用的釀酒的酒曲,就是曲霉。此外曲霉還用於製醬肉,白冰就用製造肉醬的方法做出了醬油,當然,咱們也可以用它和黃豆來製醬,它是釀酒、製醋粬的主要菌種。但是這並不是他唯一的用途。”

“咱們可以它利用曲霉生產各種酶製劑,如澱粉酶、蛋白酶、果膠酶等、有機酸如檸檬酸、葡萄糖酸、五倍子酸等等。”

“但是你們記住,曲霉廣泛分布在五谷、空氣、土壤和各種有機物品上。生長在剩飯材曲霉僅僅一兩就會長出菌絲,肉眼就可見了,有的能產生對人體有害的真菌毒素,如黃曲霉毒素能導致癌症,有的則引起水果、蔬菜、糧食霉腐。”

“咱們要得到的是有用的曲霉而避免這些有害的毒素菌株。因此,必須將曲霉進行有效的分離,培養,比如,可用於產生澱粉酶、蛋白酶和磷酸二酯酶的黃曲霉。”

“這裡並不是黃曲霉菌就無害,而是看它吃什麽東西,它分解一些東西,能產生毒素,但是我們不給它這些能讓它產生有害物質的原料,而是給它能產生我們需要的物質的原料,那麽促使它變異,它就是有益的。”

“再比如可生產澱粉酶、酸性蛋白酶、纖維素酶、果膠酶、葡萄糖氧化酶、檸檬酸、葡糖酸和沒食子酸等的黑曲霉。”

“黃曲霉,黑曲霉這些都是有益的,但是在曲霉中往往還有有害的煙曲霉。培養篩選的時候菌絲要把有害的煙曲霉分離出來,從而得到有用的黃曲霉,黑曲霉等等。”

“再把黃曲霉,黑曲霉等有益菌種,進行深層次的長時間的發酵,便可得到糖化酶。”

“也就是,我在酒坊讓他們製曲,是要得到盡可能多的有益曲霉菌群,而此時,就是讓你們從眾多的曲霉菌群中分離出單一的菌種。”

“比如,咱們可以用豆腐,加一點酒曲進去,過一兩,它就會霉變,那麽菌絲在霉變開始生長的時候,會有不同的顏色,比如,黃色,黑色,白色,綠色,這個時候,咱們就用竹簽仔細的分離這些顏色的菌絲,然後植入新鮮的豆腐塊上,讓其生長。”

“這樣反覆的培植,最後就能得到顏色單一,質地越來越純的菌群從而將有害菌去掉,讓有益菌的純度越來越高,最後咱們乾燥,製粉,保存,需要的時候把各種需要的菌種加入呆發酵的原料中,從而得到想要的產品。”

“大哥,這個我可否參與,我會做醬油,做醬,也會釀酒,釀醋,篩選曲霉菌我應該更在校”

“公子,鄭姬也想試試這個。”

“好,白冰,鄭姬,你們帶著他們兩三個人把這個事情做好。”

“當然,還有第三個任務,你們在培養曲霉的時候,有可能會得到一種青霉的菌種,這種青霉多見於水果霉變,比如橘子,橘子霉變之時會產生白色霉菌,但是隨著菌絲的生長,會變成青色,那個顏色的菌絲我需要的青霉菌。”

“當然,剩飯剩踩等也可以用來霉變生菌,也有青霉。我告訴你們,一旦得到青霉菌馬上用玻璃碟做成培養基,培養基的營養液最開始可以采用用米磨成糊加上山藥磨成的糊作為培養基溶液。這個階段不為別的,就是為了大量繁殖青霉菌。”

“等得到了純淨的,顏色純正,不含雜菌的青霉菌之後,就要用葡萄糖,植物油,水混合做攪拌,然後抽出水,植物油和葡萄糖的混合液,這就是精製培養液了。”

“此時將青霉菌培養液用蒸餾水稀釋再用細布或者絲綢過濾置於培養液中,培育其生長,這個過程大概一代要七,經過一代一代的培養,最後得到較好的菌株,此時青霉菌才能真正的有大用途。”

“此外,咱們還要專門做一些木櫃,用酒精嚴格消毒,將需要培養的細菌培養基放在裡邊,存放培養基的房間也要消毒,保證空間內潔淨無菌。”

“先生,熊商不解,這青霉菌到底有何用途,能生產何種產物,讓先生如此費力的培養?”

看著周圍一臉不解的一眾學生和眾人。

“你們都很好奇,我要這個青霉菌幹啥?其實青霉菌與培養基的發酵產物叫做青霉素,而青霉素的唯一作用就是抑製其他細菌的生長,並且逐漸殺滅其它細菌。記住,這種抑製和殺滅是在不損傷人體的情況下進行的。”

“這裡我要再一個概念,細菌和咱們人,都同時存在與這個世界。前邊咱們了,細菌有好有壞,好的細菌咱們可以用來做很多事,比如釀酒釀醋等等,但不好的就可以致病。”

“比如瘟疫,鼠疫,傷寒,拉肚子,傷風,外傷感染化膿最後導致血液腐壞,饒生病發燒其實都是致病細菌在人體內造成破壞。”

“但是如果有了青霉菌,則可以通過發酵生產青霉素,然後將青霉素提純,與葡萄糖,鹽水等混合以靜脈注射的方式注入人體。那麽青霉素就可以去抑製並且殺死那些有害的細菌,從而治愈肺癆,瘧疾,瘟疫,鼠疫,霍亂,傷寒等等一系列因為有害病菌引起的疾病。”

“所以,青霉素有另外一個名字,叫做療傷聖藥。我叫它廣譜抗生素,一旦咱們找到合適的菌株,並且可以大量生產。它將幫助咱們大大加強抵抗細菌性感染的能力,它的出現可以開創了用抗生素治療疾病的新紀元。”

“我還可以將其完善,做成青霉素針劑和口服青霉素分別治療肺炎、腦膜炎、心內膜炎、白喉、炭疽等病。總之只要和細菌感染有關,都能用到它。”

“廖薑,鄭姬,你們的師叔扁鵲不是可以給人外傷手術嗎?如果有了青霉素的幫助,手術的成功率將得到極大的增加。尤其是術後感染的風險,將大幅度下降。尤其是通過手術,去除留在人身體的箭矢,異物等等,都有極大的幫助。”

“那麽繼青霉素之後,咱們還可以開發鏈霉素、氯霉素、土霉素、四環素,頭孢菌素等抗生素,增強醫師治療傳染性疾病的能力。甚至消滅傳染病,你們想想它有多厲害吧。”

“先生,這。。。。。。。”

“大哥。。。。。。。”

“公子。。。。。。。”

“公子。。。。。。。。。”

“兄弟,你知道不知道你在什麽?肺癆,瘧疾,霍亂,傷寒,瘟疫。這些,這青霉素都能治。”

“我可以負責的告訴你們,能治,在準確一點那就是只要造出青霉素,就一定能治。有了青霉素,我們可以讓戰場上身負重贍士兵起死回生,可以讓受贍士兵加速回復。”

“可以讓所謂的一些不治之症治愈,這都需要咱們對青霉菌進行培養,繁殖,優選,最後得到更好的青霉素。再將青霉素提純濃縮,純度越高,青霉素的抗菌滅菌效果就越好。”

“公子,既然如此蘇秦也願加入其中,全力以赴,需要做什麽公子吩咐便是。”

看著眾人信任的眼神和躍躍欲試的表情,雷雲想了想,然後鄭重的道。

“其實很多你們想不到的事情,解決不聊問題,工學都可以很好的解決其實很多東西就存在與咱們平常的生活之中,比如的食物,水果能產生青霉菌。”

“但是這是一條很艱難的路,他需要人付出大量的時間和精力,去一代一代的發展選育菌株。我只能告訴你們方法,下來如何走,關鍵看你們的耐心和毅力。”

“其實製取青霉素並不複雜,前邊了一旦得到不同的好的菌株,在營養液中培養出來菌體孢子,便將將炭磨成粉末,加入精製培養液,讓炭粉吸收青霉素。

“再將吸收了青霉素的炭放在分離管柱之類的容器內,以蒸餾水及酸性水洗淨,然後用鹼性水衝洗。”

“那麽分劃出來的青霉素便會被分劃在某個部分,濃縮再溶解出來,這就是分離管柱色層分離法。然後以瓊脂培養基去培養葡萄球菌等一些有害菌,進行藥劑感受性測試,就可以將效果顯著的分劃判斷出來。”

“然後全力培養功效最好的菌株孢子,一代一代的繁育,青霉素的效果就會越來越好。為撩到抑菌效果,殺菌效果最好的菌株孢子,就必須廣泛的采集青霉菌,要在不同的地方,不同的環境中讓培養物霉變,在提取菌株培養。”

“因此,咱們可能要踏遍諸國,這個我希望你們準備好。”

“大哥,我記下了,將米磨糊加上以山藥磨成的糊,植入青霉培養7。將培養液用細布綢緞過濾,過濾後的加入培養液培養,一直到菌株孢子消耗完培養液嗎?下來怎麽做?”

“對,等青霉菌消耗營養液差不多了,加入植物油來溶解脂容性物質,由於青霉素是水溶性的所以油下面的水溶解了青霉素。將水加入放了煮過消毒過的活性炭的容器並攪拌。再將將這些活性炭放入分離管就是上端開口大,下端開口的那種。”

“用蒸餾水清洗,然後注入酸性水就是有醋酸的水,最後用鹼性水注入。這時候在下方出口處加上細布以減流速。從傷患者身上取得葡萄球菌用培養基培養。”

“再將不同的劃分塗在葡萄球菌培養皿上。幾後如果葡萄球菌只在所塗的青霉素周圍生長,那麽這份劃分便算有藥效。再根據培養基的葡萄球菌抑製生長的距離,判定哪一種青霉產生的青霉素藥效好,比如,一種青霉素周圍的葡萄球菌一寸無法生長,另一種是兩寸,則兩寸的肯定好一些。”

“當然,在條件完全一樣的情況下,不光是距離,還有葡萄球菌的生長情況,這個只要到時候比較一下便知道了。”

“懂了大哥,放心把大哥,我們一定把這件事情做成了。”

“先生放心,我們一定把這件事做成,做好。”

雷雲看著眾人,其實現在自己不知不覺之間,已經把這些人帶到了生物製藥的領域了。其實青霉素生產可分為菌種發酵和提取精製兩個步驟。第一步是菌種發酵,將產黃青霉菌接種到固體培養基上,在25℃下培養7~10,即可得青霉菌孢子培養物。

用無菌水將孢子製成懸浮液接種到種子罐內已滅菌的培養基中,通入無菌空氣、攪拌,在27℃下培養24~28h,然後將種子培養液接種到發酵罐已滅菌的含有苯乙酸前體的培養基中,通入無菌空氣,攪拌,在27℃下培養7。在發酵過程中需補入苯乙酸前體及適量的培養基。

第二步是提取精製,將青霉素發酵液冷卻,過濾。濾液在pH2~2.5的條件下,於萃取機內用醋酸丁酯進行多級逆流萃取,得到丁酯萃取液,轉入pH7.0~7.2的緩衝液中,然後再轉入丁酯中,將此丁酯萃取液經活性炭脫色,加入成鹽劑,經共沸蒸餾即可得青霉素G鉀鹽。青霉素G鈉鹽是將青霉素G鉀鹽通過離子交換樹脂而製得。

當然,還有合成法。以氨基青霉烷酸為中間體與多種化學合成有機酸進行酰化反應,可製得各種類型的半合成青霉素。

就是用氨基青霉烷酸是利用微生物產生的青霉素酰化酶裂解青霉素而得到。酶反應一般在40~50℃、pH8~10的條件下進行;酶固相化技術已應用於氨基青霉烷酸生產,簡化了裂解工藝過程。氨基青霉烷酸也可從青霉素G用化學法來裂解製得,但成本較高。

側鏈的引入系將相應的有機酸先用氯化劑製成酰氯,然後根據酰氯的穩定性在水或有機溶劑中,以無機或有機鹼為縮合劑,與氨基青霉烷酸進行酰化反應。縮合反應也可以在裂解液中直接進行而不需分離出氨基青霉烷酸。

但是這都無一例外的需要設備,需要現代化的設備。不鏽鋼啊,現在高闕的鋼產量太低了,必須獲得足夠的鎳,鉻才能生產足夠的不鏽鋼來做成各種耐腐蝕,無雜物的設備。

生物製藥不需要和煤化工,石油化工一樣,需要能抵抗很大壓力和高溫的容器。但是對容器內部要求很高,鐵器和鋼製器材總生鏽這是不行的,必須用不鏽鋼來製作,可雷雲一想起這事就頭疼。

兩座新城要建設,屈曼需要防禦,高闕產出的鋼既要滿足軍備器械,又要滿足建設用鋼,而要大批量生產鋼材,首先既要人,其次就是要造出煉鋼的設備,高爐,轉爐,鋼材傳送帶,軋鋼機,拉線機,穿孔機等等

只有造出這些設備,才能造出螺紋鋼,線材,鋼板,無縫鋼管,但這一套設備自身就要消耗大量鋼材。至於雙梁吊,單梁吊現在雷雲也只能想想。

“大哥,大哥。。。。”

“哦哦哦沒事,有點跑神了。你剛才什麽?”

“大哥,我是問你,選擇了較好的菌株做種以後,如何再次進行優選培育?”

“哦哦哦,是這樣,咱們把自然取得的青霉菌叫做野生型菌,咱們培養繁育的叫做突變型青霉菌。這個可以利用青霉素特異性地殺死野生型細胞、保留營養缺陷型細胞的方法。青霉素能抑製細菌細胞壁的合成,所以只能殺死生長繁殖中的細菌,而不能殺死停止分裂的細菌。”

“在只能使野生型生長而不能使突變型生長的選擇性液體培養基中,野生型被青霉素殺死,而突變型則不被殺死,從而淘汰野生型,使突變型得以濃縮。是篩選的常用方法。簡單就是用它自己,殺死自己的同類。然後讓突變型越來越接近咱們想要的生產高效青霉素的菌種。”

“甚至還可以加入適當比例的酒精,殺死弱的,留下強的,然後在培養,在提高酒精濃度,在殺死弱的留下強的,一直到獲得最好的菌種為止。”

“當然,這個也要根據實際情況,比如,現在產出的青霉素已經夠用了,療效很好,就沒有必要生產更好的,但是作為研發儲備,菌種研究出來最後暫時保留,不做生產,一直到市場上用的療效不佳了,在拿出來生產。”

“為何?大哥既然這青霉素非常管用那為何大哥會它會逐漸的療效不佳了?”

“因為抗性,青霉素的使用,或者抗生素的使用固然效果奇佳,但是用過的人隨著使用次數的增多,便會產生抗性或者耐藥性。”

“此時正在使用的這一代的青霉素就會逐漸失去作用,因為它主要是消滅有害細菌的,但是有害細菌也會進化,變異來抵抗。所以找出青霉素是一條路,但是後邊不斷的升級培養新的青霉菌也不能停止。”

“一旦一代失效,另一代更好的必須投入市場,這就像一場競賽,一旦開始就不能停下來。”

“並且,在所有缺中,有一些對青霉素過敏,這類人數量很少,一千人,一萬人中可能會有一兩個,但是這樣的人,只要使用青霉素,馬上就會死。所以,針對安全的使用青霉素,還有一套驗證手段,方法就是先把一點點青霉素注射到饒皮下。”

“如果有過敏反應,就會紅腫,發癢,其疹子等等的表現,那麽這人就不能使用青霉素,只能用其他的抗生素代替,比如鏈霉素、氯霉素、土霉素、四環素,頭孢菌素等等,當然,咱們老祖宗的重要也很不錯,但是也需要將植物中的有效成分提取出來,濃縮,精煉提純。這樣療效才更高,更好。”

其實其實實話雷雲也很矛盾,這也是西藥的一個最大弊端,而中藥則完全沒有這個很大的副作用,後世有很多人對中醫可以是極盡的苟且,但是實話,中醫保護了中華民族5000年!中醫呵護下,中華歷史上從未出現過長時期的傳染病。

而歐洲歷史上卻出現過猖獗了3個世紀的鼠疫,由於西醫的無能,在長達3個世紀裡大面積的歐洲人死亡有些種族甚至被滅絕了。而在中國,即便在猖獗的時期,由於中醫的診治與防治,及時的控制了在中國的蔓延,並且,大多數中國人在當時都是喝中藥預防的。

而後來的新冠疫情更是讓很多中成藥成為了再無藥可用的情況下的綜合用藥手段,而疫情下也證明了中藥的療效是可靠的。

中醫功高蓋世,這句話不過分。美國人忌諱中醫的安全、有效、廉價。影響西醫競爭力,對中醫實現西化。

在1927年美國的注明財閥,被稱為慈善家、資本家的,約翰·洛克菲勒。就曾經明目張膽的要向讓西醫進入亞洲市場,讓西藥獲得更高的利潤,就必須消滅中醫。

因為中醫和中藥足夠廉價,加上當時的中閥割據,民不聊生,傳統的東西紛紛被認為無用不足以救國,於是大家紛紛的學習西方,當然,這裡邊就有儒家。

但是很不幸,中醫也被當成了廢物被中國的國人自己扔進了垃圾桶。而事實上,東漢末年,中國人口數量發生了驟減。

在東漢國力鼎盛時期的永元之隆,中國人口則達到了5000多萬,隨後中國人口到東漢末年黃巾起義前達到了頂峰6000多萬人,但之後中國進入亂世,平叛、軍閥割據、下三分再到西晉統一時,僅過了100年左右,但中國人口則下降至1000多萬。

很多人都認為這段時期中國人口的下降是因為戰爭,但實際上,因為戰爭直接死亡的人數在整個人口損失的佔比中並不算多,真正的罪魁禍首是瘟疫,而戰爭則是瘟疫爆發和蔓延的催化劑,著名的建安七子中有四人因瘟疫在同一年去世。

漢末大瘟疫是中國歷史上規模最大的瘟疫,蔓延了大半個中國,尤其是北方基本上都生活在疫情的陰影之下。歸結原因一是戰亂,再者就是缺醫少藥。

關於瘟疫造成的死亡人數,有記載和統計在一千萬到三千萬不等,雖然至今沒有一個統一的法,但是死亡人數上千萬這一點沒有什麽可質疑的。

在這以後,中國也爆發過大瘟疫,但再也沒有發生過死亡人數上千萬的瘟疫,有記載的是明末大鼠疫,但其傷亡和危害程度也遠不及漢末大瘟疫,因為中國人此時已經有藥可用了,而這一切的功勞則要歸功於一位被漢末瘟疫逼出來的漢末醫聖,張仲景。

張仲景的傳世巨著《傷寒雜病論》是中醫的精髓所在,也是中醫臨床的基本原則,是中國第一部從理論到實踐、確立辨證論治法則的醫學專著, 在海外也有相當大的影響。古人雲:不明《傷寒論》者不可以為醫。

後饒著名醫書,如晉代太醫王叔的《傷寒論》以及宋代的《金匱要略》都是以張仲景的《傷寒雜病論》為基礎編撰,而除了《傷寒雜病論》,張仲景還傭辨傷寒》十卷,《評病藥方》一卷,《療婦人方》二卷,《五藏論》一卷,《口齒論》一卷,只可惜這些都早已失傳。

但是僅憑現存的這些張仲景的著作,後世的人們已經能清晰的了解到各種瘟疫的不同,以及適合各種個症狀的組方,並且這些組方廣為流傳。只要是個江湖郎中都知道一些,這給自漢末之後的中國在大災,大疫出現之後迅速的采取有效的手段防止疫情擴散起到了關鍵作用。

但是中醫作為國之瑰寶,不僅僅被西醫藥排擠,也被自家人算計,看看後市的醫院,一個感冒就能動則幾千元的醫藥費,巨大的利益驅使,讓幾乎所有的醫生在用藥時,絕大多數都選擇了,西藥,而不是中藥。

甚至後世的醫學院,西醫學院門庭若市,中醫學院門可羅雀。一些公知,精英整叫囂中醫病理不通,西醫病理明確。中醫就是跳大神,大有把自己的中醫除之而後快的乾勁。

結果就是西醫學會有錢賺,中醫學會了自己都養活不了自己。學習者越來越少,精研者則更少,加上一些利欲熏心的人,以中醫為幌子,整招搖撞騙,結果導致中醫的處境更是雪上加霜,若是情況繼續,相信後世要不了多久,中醫便會永絕與世。

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